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动物源性DNA检测试剂盒应当怎样操作?
  动物源性DNA检测试剂盒需要严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
 
  反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心30秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
 
  建议使用试剂配套动物基因组DNA提取系列产品,具体过程详见产品说明书。剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管,放置在室温待解冻后,离心30秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入5μL模板,顺序为NG、待测样品模板。盖好配套的PCR管盖后,涡旋混匀30秒,离心1分钟,立即进行PCR扩增反应。
 
  需要按试剂准备中描述的方法,配制好动物源性DNA检测试剂盒各种组分的工作液。
 
  所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
 
  从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
 
  设置标准品孔、样本孔和空白孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,样本孔加待测样本50μL,空白孔不加。
 
  用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育60分钟。
 
  除空白孔外,标准品孔和样本孔,加入过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
 
  揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。
 
  将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育15分钟;
 
  如此重复4次,若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20秒的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。

上海睿玥实验器材有限公司主营产品:全自动熔点测定仪,梯度PCR基因扩增仪,平行反应合成仪
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