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动物源性DNA检测试剂盒如何去操作呢?
       动物源性DNA检测试剂盒是为专业的高通量实验室设计的,但是现在这种试剂盒是适合中低等通量的实验室使用,这个试剂盒专门为每天需要制备的样品量达到100个的实验室而设计。
  该试剂盒在连接探针末段引入不同长度的标签序列,获得长度各异的目的探针连接产物,利用荧光标记的通用引物对连接产物进行PCR扩增,通过荧光毛细管电泳对扩增产物进行电泳分离检测,后通过对电泳图谱的分析获取各个位点的峰高,进而对样品目的区域的拷贝数进行分析。
  建议使用试剂配套动物基因组DNA提取系列产品,具体过程详见产品说明书。剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管,放置在室温待解冻后,离心30秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入5μL模板,顺序为NG、待测样品模板。盖好配套的PCR管盖后,涡旋混匀30秒,离心1分钟,立即进行PCR扩增反应。
  1、需要按试剂准备中描述的方法,配制好动物源性DNA检测试剂盒各种组分的工作液。
  2、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
  3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
  4、设置标准品孔、样本孔和空白孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,样本孔加待测样本50μL,空白孔不加。
  5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育60分钟。
  6、除空白孔外,标准品孔和样本孔,加入过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
  7、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干。
  8、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育15分钟;
  9、如此重复4次,若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20秒的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。

上海睿玥实验器材有限公司主营产品:全自动熔点测定仪,梯度PCR基因扩增仪,平行反应合成仪
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