产品名称:川贝母检测试剂盒

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更新时间:2024-03-13

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产品特点:根据DNA基因特异性采用聚合酶链式扩增( PCR)和限制性酶切技术,主要对川贝母DNA成分鉴定进行检测与鉴定。参照中国药典2020年版。

川贝母检测试剂盒的详细资料:

 PCR-RFLP 反

PCR反应体系:在 200ul离心管中进行,反应总体积为30ul, 反应体系包括2XPCR预混液15ul,鉴别引物(30umol/L)各0.5ul,模板 l ul,无菌超纯水13ul。将离心管置PCR仪,PCR反应参数:95°C 预变性4分钟,循环反应30次(95°C 30秒,55〜58°C ,72°C 3 0 秒 ),7 2 °C延 伸 5 分 钟 。 取 P C R 反 应 液 ,置 500ul离心管中,进行酶切反应,反应总体积为20ul,反应体系包括10X酶切缓冲液2ul,PCR反应液6ul,Sma I(10U/M1) 0.5ul,无菌超纯水11.5ul,酶切反应在30°C水浴反应2小 时。另取无菌超纯水,同法上述PCR-RFLP反应操作,作为空白对照。


电泳检测照琼脂糖凝胶电泳法(中国药典2020年版通则0541)

胶浓度为 1.5%,胶中加入核酸凝胶染色剂GelRed;供试品与对照药材 酶切反应溶液的上样量分别为8ul, DNA分子量标记上样量为 l ul (0.5ug/ul)。电泳结束后,取凝胶片在凝胶成像仪上或紫外透射仪上检视。供试品凝胶电泳图谱中,在与对照药材 凝胶电泳图谱相应的位置上,在100〜250bp应有两条DNA 条带,空白对照无条带。 


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