Ovation人类FFPE RNA-Seq多重文库构建试剂盒使用从人类组织或细胞系获得的纳克级总RNA,为链特异性RNA-Seq文库构建提供了端到端的解决方案。该工作流程同样适用于新鲜冷冻样品(低至10 ng)的总RNA或FFPE样品(低至100 ng)的保存RNA。从总RNA输入到完整构建的文库的整合工作流程具有很高的可重复性,可以在大约7小时内完成。 NuGEN的依赖插入的AnyDeplete技术可有针对性地消除不需要的转录本,并显着减少了源自人类rRNA(12S,16S,18S和28S基因)的测序数据,从而更有效地利用了测序通量。该试剂盒均提供八个*的条形码接头,以使多重测序能够进一步优化功效。
简化的工作流程包括使用随机和多聚(T)引物的混合物反转录生成双链cDNA,双链cDNA打断,末端修复以生成平末端,接头进行连接,通过核苷酸类似物靶向降解的链选择,AnyDeplete技术介导的接头裂解和PCR扩增以产生终文库。 整个工作流程,包括片段化,都可在短短7个小时内完成,并生成可用于在Illumina测序平台上进行单端或双端测序的簇形成的DNA文库。
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