荧光定量PCR仪‌（qPCR仪）是一种用于实时监测DNA扩增过程的高精度分子生物学设备，广泛应用于基因表达分析、病原体检测、物种鉴定、SNP基因分型和转基因鉴定等领域。

二手荧光定量PCR仪是否需要维修，可通过系统性观察运行状态、验证关键性能指标和排查常见故障表现来综合判断‌。

1.     熔解曲线是否均一？

大家通常有一个误区就是看升温降温的速率来判断温控的好坏，比如快速升温10C/min以上。其实这是没有意义的，因为您的PCR管内的液体试剂根本达不到这个升温速率。实际真正需要考虑的是各个Peltier的温控片是否温度一致，或者控制Peltier的电路板在计算温度的数据处理是否结果接近。 通常，我们使用同样的试剂在加热模块的不同位置进行染料法扩增，随后获得的Tm值是否接近？一般来说，全新的qPCR仪获得Tm值误差应在±0.3℃以内。对于二手qPCR仪，Tm值的误差会大一点，但应在±0.5℃以内。 误差大于±0.5℃的qPCR仪是不合格的。 这类二手机是需要检查维修，找出Tm值误差大的原因。

2.     Ct值是否均一？

对于不同peltier片的相同试剂需要测试Ct值是否有误差。通常qPCR仪获得Ct值误差应在±0.3以内。二手机毕竟不是新机，可以把Ct值误差放宽到大于±0.5。Ct值误差大于±0.5的qPCR仪是不合格的，需要进一步检测光路或加热模块来维修。Ct值误差大的机器是无法通过RNase P板验证的。很多人认为测加热模块的每个孔温度误差就可以确保qPCR仪的好快，这其实是个误区，因为加热模块的温度均一不代表你可以获得均一的Ct值。相反，RNase P板验证合格是必须加热模块温度均一，同时荧光光路正常，并且机器的数据处理是正常的。因此有条件的客户，应该对二手qPCR仪进行RNase P板的现场验证。

3.     长时间开机是否稳定？

二手机的常见故障是机器不稳定，因此偶尔跑一次实验正常不能说明机器是正常的。 实际上，要避免二手qPCR仪不出错几乎是不可能。 我们只能从概率上去减少机器不稳定的可能。因此，建议二手机需要连续运行3天，每天连续运行3-4次实验。如果这样运行正常，大概率这台二手机是稳定的。

       4. 运行出现报错码

这属于硬故障，用户至需要把对应的报错信息和报错码提供给维修方即可。值得注意的是，报错的内容是一个错误结果，并非故障的原因，因此故障仍需排查的。